供了另一种控制细胞和体内蛋白质周转的方法。 SULI 与之前报道的光开关蛋白周转标签 (LID) 最显着的区别在于其运行机制。SULI在光照射下稳定;是,LID 在光照射下表现出加速降解。SULI 和 LID 的相反光响应使它们相当互补,因为每种蛋白质稳定性标签具有不同的特性和强度。用 SULI 标记的蛋白质
保持在“关闭”或低水平状态,直到光照。相反,对于电话号码数据库带有LID标记的蛋白质,需要持续用 和 SSC-H/SSC-A。为了进行放线菌酮追踪实验,将工程细胞在蓝光照射下培养过夜并稀释至OD 600 0.1的密度。然后将培养物在光照或黑暗条件下培养至 OD 600在添加

1 mM 放线菌酮 (CHX) 抑制蛋白质合成之前,约为 1.0。在指定时间点取出等分试样,并使用上述 Beckman CytoFLEX-S 流式细胞术分析 mCherry 荧光。为了检测哺乳动物细胞中的 mCherry 荧光,通过胰蛋白酶消化收获转染的细胞并用 PBS 缓冲液重悬。使用上述 Beckman